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PfuDNA聚合酶(Pfu DNA polymerase),又稱Pfu聚合酶,或Pfu酶,是在嗜熱的古核生物火球菌屬內(nèi)發(fā)現(xiàn)的,一類能在活體內(nèi)進(jìn)行DNA復(fù)制的酶。該酶含有2個(gè)蛋白亞基(P45和P50),為多聚體,分子量約為90kDa。該酶同時(shí)具有5'-3'聚合酶活性和3'-5'外切核酸酶活性,因此在聚合反應(yīng)中可糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,忠實(shí)性極高。體外實(shí)驗(yàn)中,在聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction, PCR)中,使用Pfu聚合酶可以快速,高保真的擴(kuò)增DNA片段。
Sso7d是來(lái)源于Sulfolobus solfataricus的一種雙鏈DNA結(jié)合蛋白,與DNA聚合酶融合后,聚合酶的進(jìn)行性得到了顯著的提升,而其對(duì)聚合酶催化活性和熱穩(wěn)定性沒(méi)有影響
格朗瑞的PfuDNA聚合酶,可以用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng),包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成等。
閱讀: 2016-01-12 09:25:20