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企業(yè)新聞

膠體金免疫層析產(chǎn)品開發(fā)經(jīng)驗(yàn)分享

一、PH在膠體金技術(shù)中是非常重要的,不同抗體的標(biāo)記的PH主要是根據(jù)最后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(陽性程度,敏感度等)來確定的,每種產(chǎn)品的PH都要摸索,沒有固定的 
1、合適的PH決定標(biāo)記蛋白與裸金的結(jié)合效率,以及結(jié)合的穩(wěn)定性
2、適當(dāng)?shù)腜H對于標(biāo)記后的膠體金的液態(tài)保存的穩(wěn)定性有影響
3、適當(dāng)?shù)腜H對于產(chǎn)品的假陽性以及假陰性有一定的控制
4、適當(dāng)?shù)腜H可以調(diào)整T線的顯色強(qiáng)度

二、最適蛋白標(biāo)記量:直接把不同的標(biāo)記量的金做成半成品,看標(biāo)記濃度低到啥程度對結(jié)果沒影響,在那個基礎(chǔ)上再適當(dāng)提高點(diǎn)濃度就成了。

三、表面活性劑有破膜的作用,紅細(xì)胞膜破了,血紅蛋白出來了,背景自然也就高了,當(dāng)然并不是所有的表面活性劑都有破膜的作用或者破膜作用并不嚴(yán)重。用全血過濾膜只能過濾紅細(xì)胞,但是表面活性劑選擇不對,背景還是不會有太大的改善。如果是用快速診斷方法檢測,建議使用新鮮的血液,超過一周的最好就處理掉把,血液長時間放置會自發(fā)性的溶血,保存在2-8度,低溫凍存更會加速溶血。全血檢測需加入全血分離膜,分離血漿和血細(xì)胞(主要是紅細(xì)胞),全血分離膜是否要處理看具體的要求,以及使用的種類。表面活性劑的種類及濃度如果控制不好會加速紅細(xì)胞的破裂,

四、T線邊緣深中間淺的原因:樣品墊或者樣品稀釋液的配方:注重PH,離子強(qiáng)度,表面活性劑三方面。酸堿度一般可以選擇7.5-9之間
離子強(qiáng)度可以在20-150mM之間
表面活性劑,多嘗試下不同的濃度和種類,一般常用的是Tween,TritonX-100,濃度在0.1-1%左右

五、釋放慢可能有幾個原因:
1.金標(biāo)墊本身的材質(zhì)決定。但是這個可能性比較小
2.如果你是浸泡法處理,處理液中蛋白或者大分子材料,以及糖的濃度都會影響金的釋放, 
3.如果你是噴金,金標(biāo)墊如需預(yù)處理,預(yù)處理液液有可能影響,原因同上
4.最后一個估計(jì)是最不愿遇到的,處理液的配方?jīng)]有選擇好,噴金或者浸泡后,部分膠體金變性聚集,無法層析

閱讀:  2016-12-15 09:47:56  

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