支原體簡介

支原體（mycoplasma）：又稱霉形體，為目前發(fā)現(xiàn)的最小的最簡單的原核生物。支原體

細胞中唯一可見的細胞器是核糖體（支原體是原核細胞，原核細胞的細胞器只有核糖體）。

支原體是在 1898 年發(fā)現(xiàn)的，又稱人形支原體，是一種簡單的原核生物。其大小介于細菌和

病毒之間。結(jié)構(gòu)也比較簡單，多數(shù)呈球形，沒有細胞壁，只有三層結(jié)構(gòu)的細胞膜，故具有較

大的可變性。支原體的大小為 0.2～0.3um,可通過濾菌器，常給細胞培養(yǎng)工作帶來污染的麻

煩。菌落小（直徑 0.1~1.0mm），在固體培養(yǎng)基表面呈特有的"油煎蛋"狀。無細胞壁，不能

維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性，對滲透壓敏感，對抑制細胞壁合成的抗生素不敏感。

支原體污染的來源

包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染（一些支原體在人體是正常菌群）、培養(yǎng)基的

污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織

或器官的污染。

支原體污染對細胞的影響

1、影響細胞的生長狀態(tài)及形態(tài)

支原體可使培液中支持細胞生長的營養(yǎng)物質(zhì)含量減少，造成細胞生長緩慢甚至停止；細

胞狀態(tài)變差，生長變慢，在顯微鏡下觀察可能會有小黑點，但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁。會導(dǎo)

致細胞微管解聚，引起細胞一系列病變，表現(xiàn)為細胞收縮、貼壁細胞脫落、裂解等。細胞傳

代以后就出現(xiàn)細胞間黑點，細胞空泡化，很多類似凋亡、壞死的細胞，最終細胞漂浮，完全

死亡。

2.影響細胞的代謝和功能

（1）培液中的精氨酸被支原體大量消耗，引起細胞蛋白質(zhì)、DNA、rRNA、mRNA 的合成

障礙；

（2）支原體活動使培養(yǎng)基成分發(fā)生改變（如發(fā)酵型支原體降解糖類產(chǎn)生酸性物質(zhì)），影響

細胞代謝；

（3）支原體吸附在細胞表面，破壞細胞膜的完整性，影響細胞信號傳遞；

（4）支原體消耗細胞的核苷庫—染色體異常。

3、其他

此外，支原體污染還會影響一些病毒在細胞中的產(chǎn)量、使惡性細胞致癌能力下降、影響

淋巴細胞分化等。

支原體污染的檢測方法

1、培養(yǎng)法

原理是利用營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基，直接對待檢細胞、血清等進行支原體培養(yǎng)。

缺點：靈敏度低，試驗周期長，不能檢測到種且不適用于檢測所有支原體。

2、DNA 熒光染色法

利用熒光 Hoechst33258標記細胞和支原體 DNA,在紫外光(波長為 630 nm)激發(fā)下產(chǎn)生黃綠色熒光，利用熒光顯微鏡觀察支原體是否存在。

缺點：有時易出現(xiàn)假陰性和假陽性

3、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法

通過擴增被檢測標本中的支原體 DNA ,再進行瓊脂糖凝膠電泳。電泳完畢，將電泳膠在

紫外投射儀下觀察，根據(jù)標準分子量及陽性對照、內(nèi)對照條帶，觀察待測樣品中是否有陽性

條帶

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閱讀：  2016-04-15 11:31:20