產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
保存溫度:2-8℃(避光保存)
檢測樣本:動物、水產(chǎn)組織、蜂蜜
運輸條件:2-8℃低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,避免冷凍
生產(chǎn)日期:見包裝盒
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年
需要的器材和試劑
1.儀器:酶標儀、打印機、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平
2.微量移液器:單道20?l-200?l,100?l-1000?l、多道300?l
樣本前處理
1.樣本處理前須知:實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
2. 配液:配液1:復(fù)溶液,將10×復(fù)溶液用去離子水10倍稀釋,用于樣本的復(fù)溶,復(fù)溶液在4℃環(huán)境可保存一個月。
酶聯(lián)免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實驗開始前,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
1.編 號:將樣本和標準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
2.加樣反應(yīng):加標準品或樣本50?l/孔到各自的微孔中,然后加酶標記物50?l/孔,再加入50?l/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)30分鐘。
3.洗 滌:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250?l/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
4.顯 色:每孔加入底物液A 50?l,再加底物液B 50?l,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
5.終 止:每孔加入終止液50?l,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
6.測吸光值:用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
結(jié)果分析
1.百分吸光率的計算
標準液或樣本的百分吸光率等于標準液或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以第一個標準液(0ppb)的吸光度值,再乘以100%
2.標準曲線的繪制與計算
以標準液百分吸光率為縱坐標,對應(yīng)的標準液濃度(ppb)的對數(shù)為橫坐標,繪制標準液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標準曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實際濃度。
產(chǎn)品貨號:DR015